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(限血清樣本)
Bioss 試劑盒優(yōu)點(diǎn)
高靈敏度及特異性:可準(zhǔn)確識(shí)別樣本中低含量的目標(biāo)檢測(cè)物;
快速簡(jiǎn)便操作:無需昂貴設(shè)備及相關(guān)操作經(jīng)驗(yàn);
穩(wěn)定性:實(shí)驗(yàn)重復(fù)性良好,變異系數(shù)低;
種類豐富:提供多種選擇性;
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)易于處理分析。
試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線示例
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以上列表中ELISA試劑盒均采用雙抗體夾心法,此方法是檢測(cè)抗原最常用的方法。
雙抗體夾心法ELISA實(shí)驗(yàn)方案
雙抗夾心法是指將特異性結(jié)合抗原的抗體包被于微孔板上,制備成固相抗體,向微孔板中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣本,再與HRP標(biāo)記另一株特異性針對(duì)抗原的抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,加入TMB底物顯色后,形成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與樣本中抗原的量呈正相關(guān),再由酸終止反應(yīng)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),通過擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中抗原含量。
注:雙抗體夾心法必須采用經(jīng)測(cè)試過的配對(duì)抗體進(jìn)行。
ELISA實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
?在臨床檢驗(yàn)中,此法適用于檢測(cè)各種蛋白質(zhì)等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、HCG等。
?只要獲得針對(duì)受檢抗原的特異性抗體,就可以用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物而建立此法。
?如抗體的來源為血清,包被和酶標(biāo)用的抗體最好分別取自不同種屬的動(dòng)物。
?如應(yīng)用單克隆抗體,一般選擇兩個(gè)針對(duì)抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結(jié)合物。
?這種雙位點(diǎn)夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗體一起保溫反應(yīng),作一步檢測(cè)。
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