背景介紹
生物素-親和素系統(tǒng)(Biotin-Avidin—System, BAS)是70年代末發(fā)展起來的一種新型生物反應(yīng)放大系統(tǒng)。隨著各種生物素衍生物的問世,BAS很快被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等各個研究領(lǐng)域。近年大量研究證實,生物素—親和素系統(tǒng)幾乎可與目前研究成功的各種標(biāo)記物結(jié)合。生物素與親和素之間高親合力的特異性結(jié)合以及多級放大效應(yīng),使BAS免疫標(biāo)記和有關(guān)示蹤分析更加靈敏。目前它已廣泛用于微量抗原/抗體定性、定量檢測及定位觀察研究,還可以制成親和介質(zhì)用于上述各類反應(yīng)體系中反應(yīng)物的分離和純化。
產(chǎn)品介紹
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生物素—親和素/鏈霉親和素系統(tǒng)應(yīng)用優(yōu)勢:
靈敏度
生物素容易與蛋白質(zhì)和核酸類等生物大分子結(jié)合,形成的生物素衍生物,不僅保持了大分子物質(zhì)的原有生物活性,而且比活度高,具多價性。此外,每個親和素分子有四個生物素結(jié)合部位,可同時以多價形式結(jié)合生物素化的大分子衍生物和標(biāo)記物。因此,BAS具有多級放大作用,使其在應(yīng)用時可極大地提高檢測方法的靈敏度。
特異性
親和素與生物素間的結(jié)合具有極高的親和力,其反應(yīng)呈高度專一性。因此,BAS的多層次放大作用在提高靈敏度的同時,并不增加非特異性干擾。而且,BAS結(jié)合特性不會因反應(yīng)試劑的高度稀釋而受影響,使其在實際應(yīng)用中可最大限度地降低反應(yīng)試劑的非特異作用。
穩(wěn)定性
親和素結(jié)合生物素的親和常數(shù)可為抗原—抗體反應(yīng)的百萬倍,二者結(jié)合形成復(fù)合物的解離常數(shù)很小,呈不可逆反應(yīng)性;而且酸、堿、變性劑、蛋白溶解酶以及有機溶劑均不影響其結(jié)合。因此,BAS在實際應(yīng)用中,產(chǎn)物的穩(wěn)定性高,從而可降低操作誤差,提高測定的精確度。
普適性
生物素—親和素系統(tǒng)的多功能性還能提供一套統(tǒng)一的研究方法。例如對于某待測分子,已經(jīng)得到了對于該分子的生物素標(biāo)記抗原,那么配合結(jié)合親和素的膠體金可以在電鏡下觀測,配合結(jié)合熒光標(biāo)記的親和素可以使用流式細胞儀篩選,配合連接到酶的親和素可以進行ELISA等免疫組化實驗。
其他
BAS可依據(jù)具體實驗方法要求制成多種通用性試劑(如生物素化第二抗體等)適用于不同的反應(yīng)體系,而且都可高度稀釋,用量很少,實驗成本低;尤其是BAS與成本高昂的抗原特異性第一抗體偶聯(lián)使用,可使后者的用量大幅度減少,節(jié)約實驗費用。此外,由于生物素與親和素的結(jié)合具高速、高效的特性,盡管BAS的反應(yīng)層次較多,但所需的溫育時間不長,實驗往往只需數(shù)小時即可完成。