要使用某標(biāo)記產(chǎn)品,可市面上壓根沒有現(xiàn)貨……沒問題,來Bioss做最快最全的標(biāo)記服務(wù),7個工作日內(nèi)全都幫您搞定!Bioss提供抗體、蛋白、多肽、小分子化合物等的29種標(biāo)記物的標(biāo)記服務(wù),標(biāo)記產(chǎn)物可搭配電鏡技術(shù)、免疫化學(xué)、分子生物學(xué)、活體細(xì)胞示蹤、生物芯片等應(yīng)用使用,對生物分子的結(jié)構(gòu)、活性、定位、功能及相互作用等進(jìn)行研究分析。
標(biāo)記種類
1、可接收的待標(biāo)記樣品包含抗體IgG、大分子蛋白、小分子多肽、小分子化合物等。
2、可提供標(biāo)記服務(wù)的標(biāo)記物有:
A.酶標(biāo)記物:堿性磷酸酶 (AP/ALP),辣根過氧化物酶 (HRP);
B.生物素 (Biotin);
C.常規(guī)熒光素:FITC,Rhodamine B (RBITC);
D.Cy系列熒光素:Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7;
E.Alexa Fluor 系列熒光素:AF350,AF488,AF555,AF594,AF647;
F.熒光蛋白:藻紅蛋白 (PE),別藻藍(lán)蛋白 (APC);
G.熒光雙標(biāo)記:
PE-Cy熒光素系列:PE-Cy3,PE-Cy5,PE-Cy5.5,PE-Cy7;
APC-Cy熒光素系列:APC-Cy3,APC-Cy5,APC-Cy5.5,APC-Cy7;
PerCP-Cy熒光素系列:PerCP-Cy3,PerCP-Cy5,PerCP-Cy5.5,PerCP-Cy7;
H.膠體金標(biāo)記Co-Au。
樣品要求
1、待標(biāo)記樣品需保證90%以上的純度,樣品中不含有干擾標(biāo)記物結(jié)合的成分,如有特殊成分,請?zhí)崆皹?biāo)注說明。
2、待標(biāo)記樣品最小標(biāo)記量為1mg,最好是干粉,如果是液體,濃度應(yīng)大于1mg/ml。
3、抗體IgG樣品中應(yīng)不含BSA、疊氮鈉、甘氨酸等成分。
4、大分子蛋白應(yīng)提供分子量、等電點、緩沖液成分及pH等信息;小分子多肽需提供氨基酸序列;小分子化合物還需提供分子結(jié)構(gòu)式。
收費標(biāo)準(zhǔn)
1、抗體和大分子蛋白標(biāo)記收費標(biāo)準(zhǔn)(單位元):
2、小分子多肽和化合物因為分子量較小,標(biāo)記和純化需要特殊處理,價格和標(biāo)記周期根據(jù)樣品的特性而定。
注意事項:
1、除了HRP的質(zhì)量外,所要標(biāo)記的抗體也要活性高、效價高、純度高、親和力好、這是保證標(biāo)記物活性的首要條件。
2、標(biāo)記物的保存條件,建議以儲存液形式保存,濃的標(biāo)記物相對穩(wěn)定,通常加入30~40%甘油于-20℃以下保存1~2年,但稀釋后,只能保存數(shù)周。故應(yīng)用液應(yīng)在12小時內(nèi)用完,切忌反復(fù)凍融。
堿性磷酸酶 (alkaline phosphatase,ALP或AP)是免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標(biāo)記酶之一,優(yōu)點是穩(wěn)定性高、靈敏度高。ALP是一種能夠?qū)?yīng)底物去磷酸化的酶,即通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團(tuán)除去,并生成磷酸根離子和自由的羥基,這類底物包括核酸、蛋白、生物堿等。而該脫去磷酸基團(tuán)的過程被稱為去磷酸化或脫磷酸化。堿性磷酸酶是磷酸酶的一種,磷酸酶的作用與激酶的作用正相反,激酶是磷酸化酶,可以利用能量分子,如ATP,將磷酸基團(tuán)加到對應(yīng)底物分子上。
辣根過氧化物酶 (Horseradish Peroxidase,HRP)活性高,穩(wěn)定,分子量小,純酶容易制備,所以最常用。HRP廣泛分布于植物界,辣根中含量高,它是由無色的酶蛋白和棕色的鐵卟啉結(jié)合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為PH3~9,酶催化的最適PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下飽和度硫酸銨溶液。HRP的輔基和酶蛋白最大吸收光譜分別為403nm和275nm,一般以O(shè)D403nm /OD275nm的比值RZ (德文ReinheitZahl)表示酶的純度。高純度的酶RZ值應(yīng)在3.0左右(最高可達(dá)3.4)。RZ值越小,非酶蛋白就越多。FITC和RhodamineB (RBITC)是常見的熒光素,性質(zhì)較穩(wěn)定。
Cy系列熒光染料由于熒光較強(qiáng),對光猝滅有抵抗力而熒光不宜消退,近年來應(yīng)用比較廣泛。
ALEXA FLUOR®系列染料是由美國生命技術(shù)公司 (Life Technologies)旗下的分子探針公司 (Molecular Probes)開發(fā)的系列熒光染料,其激發(fā)光和發(fā)射光光譜覆蓋大部分可見光和部分紅外線光譜區(qū)域,應(yīng)用廣泛。以高亮度、穩(wěn)定性、儀器兼容性、多種顏色、pH值不敏感以及水溶性為主要特點。Alexa Fluor染料在一個廣泛的pH范圍內(nèi)保持強(qiáng)熒光。
PE和APC是從海藻中分離純化的,目前普遍使用的新型熒光標(biāo)記試劑。在特定波長激發(fā)下,藻膽蛋白能發(fā)射強(qiáng)烈的熒光,其熒光強(qiáng)度是熒光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子產(chǎn)率,在可見光譜區(qū)有很寬的激發(fā)及發(fā)射范圍。
PE和Cy熒光染料可以組合成熒光很強(qiáng)的共軛染料,它的特點是可以在較低的光譜下被激發(fā)(通常是488nm),同時也可以在Cy熒光染料對應(yīng)的光譜下被激發(fā),這有利于流式檢測時做更多的熒光組合。
生物素 (Biotin),又名維生素B7或維生素H,是噻吩與尿素相結(jié)合的駢環(huán)化合物,帶有一戊酸側(cè)鏈,有α,β兩種異構(gòu)體。生物素是羧化酶的輔基,在體內(nèi)參與CO?的固定和羧化反應(yīng)。生物素可以用作核酸探針的標(biāo)記物,它能與核酸分子的UTP或dUTP5‘位上的C相結(jié)合,并可與親和素結(jié)合而被檢測。在檢測的過程中,生物素只用作固定連接,而不用作信號檢測。
膠體金是一種常用的標(biāo)記技術(shù),是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù),有其獨特的優(yōu)點。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能利用到。