文章信息
IF=14.919
引用產(chǎn)品：bs-0979R（Rabbit Anti-CD38）
Sample：Rat
Application：IF
文章作者及單位：王金鳳 中國科學(xué)院北京生命科學(xué)研究院
文章摘要
研究背景
人體不同系統(tǒng)內(nèi)微生物群并不是彼此分離。異源細(xì)菌可能普遍傳播和定植于另一個組織或器官，刺激炎癥并增加癌癥等疾病發(fā)生的風(fēng)險。以往存在許多微生物交叉定植的例子，例如共生細(xì)菌可從其他部位傳播到孕婦子宮腔及胎兒體內(nèi)，以及由于腸道細(xì)菌易位到胎盤而誘發(fā)先兆子癇。普遍認(rèn)為胃酸可以阻止口腔與腸道之間有效微生物通訊和易位，但近期已證實口腔細(xì)菌可頻繁通過消化道遷移到腸道。在胰腺癌和結(jié)腸直腸癌中均觀察到特定口腔細(xì)菌如核梭桿菌的富集。
類似胃液和宮頸粘液，可以阻礙微生物在口腔與腸道、子宮腔與陰道之間自由通過。而當(dāng)前高遷移率子宮微生物和細(xì)菌物種的來源被廣泛關(guān)注。與陰道微生物群相反，目前仍對子宮腔內(nèi)微生物群缺乏了解。據(jù)報道女性上生殖道中可能普遍存在活菌，其中包括子宮在內(nèi)。關(guān)于微生物類群，主要在同一個體生殖道的不同部分之間共享，這表明從陰道到腹膜，微生物群逐漸變化，據(jù)推測女性下生殖道或腹膜液中微生物可轉(zhuǎn)移至上生殖道中。
各類乳酸桿菌是健康育齡女性陰道中的主要細(xì)菌，其產(chǎn)生的乳酸可維持陰道環(huán)境低pH值，抑制有害菌生長，使微生態(tài)保持相對平衡的狀態(tài)。而在異常情況下，陰道乳酸桿菌豐度可能顯著降低，導(dǎo)致pH升高。pH值升高會導(dǎo)致有害細(xì)菌如加德納菌和普雷沃氏菌的增殖，從而導(dǎo)致微生態(tài)失調(diào)以及相關(guān)疾病發(fā)生風(fēng)險的增加，包括細(xì)菌性陰道病和尿路感染。同樣子宮微生物群的改變與各種宮內(nèi)疾病密切相關(guān)，如子宮內(nèi)膜異位癥，子宮內(nèi)膜息肉和子宮內(nèi)膜癌，甚至可能影響子宮內(nèi)膜對胚泡的接受性。由此可見，陰道和子宮微生物群的生態(tài)穩(wěn)定性對女性生殖系統(tǒng)的健康起著重要作用。理論上，子宮腔和陰道在生理上是相鄰的，陰道細(xì)菌有機(jī)會通過子宮頸向上遷移至子宮。以往研究推測宮內(nèi)感染是由陰道細(xì)菌上升到宮腔引起的，但這兩個部位之間的微生物交流仍不清楚，當(dāng)陰道細(xì)菌轉(zhuǎn)移到上生殖系統(tǒng)時，子宮內(nèi)微生物群調(diào)節(jié)和疾病誘發(fā)的機(jī)制仍然模糊不清。
研究結(jié)果（一）
陰道擾動引起的子宮微生態(tài)失調(diào)
實驗設(shè)計：
本實驗隨機(jī)選擇健康、患有慢性子宮內(nèi)膜炎和細(xì)菌性陰道病的女性各10名，并對其進(jìn)行陰道灌洗，將灌洗液移植到已接受1周抗生素治療的SD大鼠(n=10)陰道中。移植后每天一次（連續(xù)3周）進(jìn)行qPCR和ELISA實驗，治療結(jié)束后進(jìn)行顯微鏡學(xué)觀察、TNF-α和CD38免疫熒光實驗。
實驗結(jié)果：
在慢性子宮內(nèi)膜炎患者陰道菌群移植的大鼠中，TNF-α、CD38、IL1β等細(xì)胞因子和炎性因子的mRNA表達(dá)水平比移植健康組和對照組的微生物群顯著升高。細(xì)菌性陰道病組中細(xì)胞因子水平也有所升高但低于慢性子宮內(nèi)膜炎組，該結(jié)果反映子宮內(nèi)膜炎患者陰道微生物群可有效刺激子宮炎癥。慢性子宮內(nèi)膜炎組大鼠子宮體水腫增大，表現(xiàn)為多發(fā)點(diǎn)狀炎性病變(5×視野)，子宮內(nèi)膜增生(25×)和多核細(xì)胞增多(50×)。免疫熒光檢測結(jié)果顯示，與健康組和對照組相比，慢性子宮內(nèi)膜炎組的子宮內(nèi)膜組織中存在TNF-α和CD38信號。
實驗結(jié)論：
慢性子宮內(nèi)膜炎女性陰道微生物群可引起子宮腔炎癥，可能由細(xì)菌易位或炎癥因子引起，這些因子可穿過宮頸屏障進(jìn)入子宮腔。
陰道細(xì)菌對子宮內(nèi)膜的破壞及保護(hù)作用
作者為研究某些陰道細(xì)菌遷移對子宮腔的影響及其對子宮炎癥的刺激，將單個細(xì)菌移植到陰道中以建立宮內(nèi)炎癥模型。像普氏菌和梭狀芽孢桿菌為建模的理想菌種，可在子宮內(nèi)膜炎患者子宮或陰道微生物群中富集，并在不同身體部位表現(xiàn)出協(xié)同變異。作者通過基因測序等數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎組的普氏菌與梭狀芽孢桿菌更豐富。普氏菌，最初是從子宮內(nèi)膜分離出來的一種菌屬；產(chǎn)氣莢膜梭菌曾用于構(gòu)建子宮內(nèi)膜炎模型，以上兩種菌屬將用于以下陰道移植實驗。
作者推測陰道中可能存在某些細(xì)菌可通過逆轉(zhuǎn)二路普氏菌或產(chǎn)氣莢膜梭菌炎癥作用而發(fā)揮保護(hù)作用。鑒于健康女性子宮和陰道微生物組中乳酸桿菌相對豐度顯著高于子宮內(nèi)膜炎患者，故作者選擇鼠乳桿菌評估其對SD大鼠子宮內(nèi)膜健康的保護(hù)作用。
實驗設(shè)計：
處理組：
將生長至對數(shù)期的二路普氏菌每日一次（持續(xù)3周）注射到SD大鼠陰道中，注射完成3天后收集宮內(nèi)組織和子宮陰道灌洗液樣品，同時對產(chǎn)氣莢膜梭菌也進(jìn)行相同的移植程序。干預(yù)組：普氏菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌每周四次（持續(xù)三周）移植到陰道中以誘導(dǎo)子宮腔炎癥。同時將鼠乳桿菌移植到陰道內(nèi)一次，在每兩次產(chǎn)氣莢膜梭菌處理后交替補(bǔ)充，使得產(chǎn)氣莢膜梭菌和鼠乳桿菌分別每周移植到陰道中四次和兩次。為驗證陰道中細(xì)菌代謝物是否也可以引起子宮炎癥，作者增加移植一組產(chǎn)氣莢膜梭菌上清液，該處理與產(chǎn)氣莢膜梭菌組相似，不同之處在于活細(xì)菌被其培養(yǎng)液的上清液代替，干預(yù)3周。進(jìn)行顯微鏡學(xué)觀察、免疫熒光、熒光原位雜交及基因測序。
實驗結(jié)果：
處理組結(jié)果：與對照組相比，處理組宮內(nèi)組織炎癥因子水平，子宮體直徑，宮腔和陰道細(xì)菌生物量均顯著增加，且以上指標(biāo)之間存在顯著正相關(guān)，處理組大鼠子宮體表現(xiàn)出水腫增大；TNF-α和CD38抗體的組織切片和免疫熒光結(jié)果表現(xiàn)多發(fā)點(diǎn)狀炎癥和子宮內(nèi)膜增生；熒光原位雜交結(jié)果顯示子宮腔內(nèi)細(xì)菌總數(shù)與移植細(xì)菌種類生物量均成較高趨勢。干預(yù)組結(jié)果：僅移植產(chǎn)氣莢膜梭菌的大鼠宮腔組織炎癥因子、子宮體直徑、宮腔陰道細(xì)菌量明顯增高。且鼠乳桿菌移植組和產(chǎn)氣莢膜梭菌上清液組之間沒有顯著差異。通過基因測序，顯示移植產(chǎn)氣莢膜梭菌的子宮腔內(nèi)有更多的梭菌。產(chǎn)氣莢膜梭菌陰道移植大鼠的子宮微生物組中發(fā)現(xiàn)有類桿菌屬和普氏菌的富集，而雙歧桿菌則呈現(xiàn)相反的趨勢。
實驗結(jié)論：
陰道中的細(xì)菌可以上升到子宮腔中定殖、生長引起炎癥，但若僅通過將其代謝物釋放到陰道中則不能達(dá)到相同水平的刺激。鼠乳桿菌可以抑制陰道產(chǎn)氣莢膜梭菌的生長并減少子宮產(chǎn)氣莢膜梭菌和其他有害菌生物量，因此可能在減少子宮炎癥中起保護(hù)作用。
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