在生物實驗中,為了能夠清楚地觀察到目標蛋白、組織或細胞,通常會采用染色的方式進行直觀驗證。面對形態(tài)各異的組織和細胞,科研工作者會用多種多樣的染色方法佐證自己的實驗結果。選擇了適當的染色液,就更容易觀察到預期的實驗現象或結果。
DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,是能與 DNA 強力結合的熒光染料,常用于熒光顯微鏡及共聚焦觀測。DAPI 可以透過完整的細胞膜,用于活細胞和固定細胞的染色。
DAPI 可以穿透細胞膜,與細胞核中的雙鏈 DNA 結合而發(fā)揮標記的作用,可以產生比 DAPI 自身強 20 多倍的熒光。顯微鏡下可以看到顯藍色熒光的細胞,熒光顯微鏡觀察細胞標記的效率高(幾乎為100 %),且對活細胞無毒副作用。DAPI 染色常用于細胞凋亡檢測,染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI 也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈 DNA 染色。細胞經熱激處理后用 DAPI 染色 3 分鐘,在熒光顯微鏡下可以看到到細胞核的形態(tài)變化。
人口腔鱗狀細胞,DAPI (C02-04002) 染色
DAB,即3,3'-二氨基聯(lián)苯胺 (3,3'-diaminobenzidine),是辣根過氧化物酶的常用生色底物,在過氧化氫的存在下失去電子而呈現出顏色變化,形成淺棕色不溶性產物,用于檢測過氧化物酶的活性。
本試劑盒靈敏度高,特異性好,可以用于在免疫組化或原位雜交時結合有辣根過氧化物酶的細胞或組織顯色,也可以用于 Western blot 中結合有辣根過氧化物酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細胞或組織內源性的辣根過氧化物酶顯色。
大鼠腦組織,DAB (C-0010) 染色
組織學和病理學標本的染色方法很多,但最基本的染色方法是蘇木精-伊紅染色。該方法可將細胞核染成藍紫色,細胞質染成粉紅色,使細胞結構對比分明。
蘇木精 (Hematoxylin) 是從熱帶植物蘇木中提取的一種色素,蘇木精不能直接染色,必須暴露在空氣中變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)——“成熟”后才能使用。蘇木精的“成熟”需時較長,配制后時間愈久,染色力愈強。蘇木素中帶正電荷的色精可吸附在細胞核中帶負電荷的核酸成份上而將細胞核染成藍紫色。伊紅是帶負電荷的酸性染料,使細胞漿呈現粉紅色或紅色。
蘇木素-伊紅染色試劑盒 (Hematoxylin-Eosin Staining Kit) 可以廣泛用于組織切片或培養(yǎng)細胞的染色,或與免疫組織化學、免疫細胞化學、免疫熒光、原位雜交等配合使用,步驟簡便,操作時間短。使用蘇木素-伊紅染色試劑盒染色后,也可以進行免疫染色或其它染料的復染。染色后的細胞核呈現藍色,細胞漿呈現粉紅色或紅色。
此染色液可以重復使用,直至認為效果不佳時再換用新的染色液。
小鼠腎組織,蘇木素-伊紅染色試劑盒 (C02-04004) 染色
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