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抗原修復(fù)（免疫組化石蠟切片）
發(fā)表者：北京博奧森生物 發(fā)表時(shí)間：2016-2-15
用于福爾馬林固定的石蠟包埋組織芯片需要抗原修復(fù)：
福爾馬林固定的組織有可能破壞了原來(lái)組織的抗原結(jié)構(gòu)，蛋白多肽發(fā)生交聯(lián)，導(dǎo)致部分抗原表位封閉，結(jié)合位點(diǎn)減少，所以需要抗原修復(fù)，以暴露原來(lái)的抗原表位，達(dá)到充分顯露抗原，以不出現(xiàn)明顯脫片現(xiàn)象為佳。
抗原修復(fù)的幾種常用方法：（供參考）
1. 微波爐加熱：在微波爐里加熱0.01枸櫞酸鈉緩沖液（pH6.0）至沸騰后將組織芯片放入，斷電，間隔5-10分鐘，反復(fù)1-2次。
適用的抗原：來(lái)源于人、大鼠、小鼠的組織標(biāo)本；來(lái)源于其他動(dòng)物種屬的組織標(biāo)本：
Bcl-2.Bax.AR.PR.C-fos.x-jum.z-kit.c-myc.E-cadherin.
ChromograninA.Cyclin.ER.Heatshock.Protein.HPV.Ki-67.MDMZ.P53.P34.P15.P-glycoprotein.PKC.PCNA.ras.Rb.等
2. 高壓熱修復(fù)：在沸水中加入EDTA(pH8.0)或0.01m枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0）.蓋上不銹鋼鍋蓋，但不能鎖定。將玻片置于金屬染色架上，緩慢加壓，使玻片在緩沖液中浸泡五分鐘，然后將蓋子鎖定，小閥門(mén)將會(huì)升起來(lái)。10分鐘后除去熱源，置入涼水中，當(dāng)小閥門(mén)沉下去后打開(kāi)蓋子。此方法適用于較難檢測(cè)或核抗原的抗原修復(fù)。（骨及軟骨組織的標(biāo)本最好選擇較溫和的微波加熱修復(fù)）
3. 沸熱修復(fù)： 電爐或水浴鍋加熱0.01M枸櫞酸鈉緩沖液（pH6.0）至95℃左右，放入組織芯片加熱10-15分鐘。
4. 酶消化方法：
常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前預(yù)熱37℃，消化時(shí)間約為5-30分鐘。適用于被固定遮蔽的抗原：包括 Collagen.GFAP. Complement.Cytokeratin.c-erB-2.LCA.LN.等
北京博奧森生物技術(shù)有限公司 免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室
