細(xì)胞培養(yǎng)基是一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的營養(yǎng)基質(zhì),它模擬了細(xì)胞在體內(nèi)生長的環(huán)境,提供必要的營養(yǎng)和促進細(xì)胞的生長和增殖。?
細(xì)胞培養(yǎng)基的主要成分包括水、氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽和其他輔助營養(yǎng)物質(zhì)。這些成分共同作用,滿足細(xì)胞的合成、代謝等生化反應(yīng)所需的物質(zhì)和能量。
細(xì)胞培養(yǎng)基的類型
根據(jù)其成分、用途和性質(zhì),培養(yǎng)基可以分為多種類型。
合成培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基的成分明確,營養(yǎng)全面,適用于各種細(xì)胞類型的培養(yǎng)。常見的合成培養(yǎng)基有MEM、DMEM、RPMI等。
天然培養(yǎng)基:天然培養(yǎng)基以動物血清或血漿為基質(zhì),添加一定量的營養(yǎng)成分,適用于某些特定細(xì)胞類型的培養(yǎng)。如添加了動物血清的DMEM稱為血清培養(yǎng)基。
無血清培養(yǎng)基:指不含任何動物來源的血清成分,以減少潛在的傳染病風(fēng)險和提高實驗的可重復(fù)性。無血清培養(yǎng)基通常需要添加特定的化學(xué)添加劑來模擬血清中的作用。目前已有多種無血清培養(yǎng)基上市,如雜交瘤細(xì)胞無血清培養(yǎng)基、CHO細(xì)胞無血清培養(yǎng)基、Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基等。無血清培養(yǎng)基通常添加生長附加成分,如激素與生長因子、低分子營養(yǎng)成分和轉(zhuǎn)鐵蛋白等促細(xì)胞生長的附加成分,一般包括胰島素、孕酮、硒酸鈉、腐胺、轉(zhuǎn)鐵蛋白等。
懸浮培養(yǎng)基:懸浮培養(yǎng)基適用于懸浮生長類型的細(xì)胞,如骨髓瘤細(xì)胞、雜交瘤細(xì)胞等。懸浮培養(yǎng)基中通常含有較少的營養(yǎng)成分,以維持細(xì)胞在懸浮狀態(tài)下的生長。
實體培養(yǎng)基:實體培養(yǎng)基適用于貼壁生長類型的細(xì)胞,如細(xì)胞系、原代細(xì)胞等。實體培養(yǎng)基中通常含有較多的營養(yǎng)成分,以滿足細(xì)胞在實體狀態(tài)下的生長需求。
誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基:誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基用于促使細(xì)胞向特定方向分化的培養(yǎng)基。通過添加分化誘導(dǎo)劑或改變營養(yǎng)成分的組成,可以實現(xiàn)對細(xì)胞分化的調(diào)控。
低氧培養(yǎng)基:低氧培養(yǎng)基用于模擬低氧環(huán)境,適用于某些特定細(xì)胞類型的培養(yǎng),如血管內(nèi)皮細(xì)胞、肌肉細(xì)胞等。低氧培養(yǎng)基中通常含有較低濃度的氧氣,以促進細(xì)胞在低氧條件下的生長和功能表達(dá)。
常用培養(yǎng)基
培養(yǎng)基有很多種,其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12是應(yīng)用較為廣泛的。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。下面,分別介紹一下它們各自的成分和特點。
MEM培養(yǎng)基
MEM培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium),即最低必需培養(yǎng)基,也稱最小基本培養(yǎng)基、低限量Eagle培養(yǎng)基,是動物細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基之一。MEM培養(yǎng)基僅含有12種必需氨基酸、8種維生素及基礎(chǔ)無機鹽,營養(yǎng)成分簡單,主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),經(jīng)過配方修訂后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)。
MEM含NEAA(非必需氨基酸)的培養(yǎng)基,是在MEM基礎(chǔ)上添加了7種NEAA,包括L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天冬酰胺、L-天冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸及甘氨酸,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身合成非必需氨基酸的副作用,有效促進細(xì)胞增殖代謝。
DMEM培養(yǎng)基
DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞。可用于多種哺乳動物原代細(xì)胞的培養(yǎng),也可以用于一些細(xì)胞系的培養(yǎng)。低糖培養(yǎng)基適合代謝作用慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。
RPMI-1640培養(yǎng)基
RPMI-1640最初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,目前已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和癌細(xì)胞的培養(yǎng),尤其是懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),是使用最為廣泛的培養(yǎng)基之一。像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。
不含葡萄糖的RPMI-1640培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。
DMEM/F-12培養(yǎng)基
DMEM/F-12培養(yǎng)基是將DMEM與Ham's F-12培養(yǎng)基以1:1比例混合改良而來的。改良得到的DMEM/F-12培養(yǎng)基,營養(yǎng)成分更為豐富,含有更多種微量元素,廣泛應(yīng)用于多種哺乳類細(xì)胞的培養(yǎng),也適用于于低血清含量下哺乳動物細(xì)胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。已在DMEM/F-12之中成功培養(yǎng)的細(xì)胞包括MDCK、膠質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、人內(nèi)皮細(xì)胞及小鼠成纖維細(xì)胞。
McCoy’s 5A培養(yǎng)基
McCoy’s 5A 培養(yǎng)基主要為肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)所設(shè)計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代移植物的生長,除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外,主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、HT-29、BHL-100等上皮細(xì)胞。
L-15培養(yǎng)基
L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和丙酮酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。
M199培養(yǎng)基
M199細(xì)胞培養(yǎng)基是一款經(jīng)典的細(xì)胞培養(yǎng)基,最早由Morgan等人于1950年設(shè)計開發(fā),主要用于研究雞胚成纖維細(xì)胞的營養(yǎng)需求。經(jīng)過不斷的優(yōu)化與應(yīng)用擴展,M199目前已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞的培養(yǎng),包括哺乳類和非哺乳類動物細(xì)胞。尤其是在非轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)、疫苗生產(chǎn)以及病毒學(xué)研究等領(lǐng)域,M199表現(xiàn)出色,成為科研和工業(yè)生產(chǎn)中的重要工具。
Bioss培養(yǎng)基選購指南