產(chǎn)品編號(hào) | S0012 |
英文名稱 | AO/EB Double Fluorescence Staining Kit |
中文名稱 | AO/EB雙熒光染色試劑盒 |
Specific References (1) | S0012 has been referenced in 1 publications.
[IF=4.539] Nannan Zheng. et al. Fabrication of denatured BSA-hemin-IR780 (dBHI) nanoplatform for synergistic combination of phototherapy and chemodynamic therapy. Colloid Surface A. 2022 Feb;634:127957
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保存條件 | 4℃避光保存,有效期1年。. |
產(chǎn)品介紹 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 吖啶橙 (Acridine Orange) 是一種熒光色素,其檢測(cè)激發(fā)濾光片波長(zhǎng)488nm,阻斷濾光片波長(zhǎng)515nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,可發(fā)出不同顏色的熒光,與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光,與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性,能透過(guò)細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。溴化乙錠 (Ethidium?Bromide, EB) 僅能透過(guò)胞膜受損的細(xì)胞,嵌入核DNA,發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)為染色增強(qiáng),熒光更為明亮,均勻一致的圓狀或固縮狀、團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征,二者很容易在熒光顯微鏡下判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見(jiàn)四種細(xì)胞形態(tài):1. 活細(xì)胞(VN),核染色質(zhì)著綠色均勻熒光并呈正常結(jié)構(gòu);2. 早期凋亡細(xì)胞(VA),核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀;3. 晚期凋亡細(xì)胞(NVA),核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;4. 非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN),核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。本產(chǎn)品AO、EB 溶液濃度為100ug/ml,所含穩(wěn)定劑不影響實(shí)驗(yàn)效果。 使用方法: 1. 使用前先根據(jù)用量,將AO 溶液和EB 溶液按1:1 混合成工作液,現(xiàn)用現(xiàn)配。 2. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或爬片,去掉培養(yǎng)基,用PBS 洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞,加入新的PBS;如果需要觀察全部細(xì)胞特性,保留未貼壁細(xì)胞,可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室溫放置2-5min 后于熒光顯微鏡下觀察。 3. 對(duì)于懸浮細(xì)胞,可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在PBS 中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS 中加入20ul 工作液即可。室溫放置2-5min 后于熒光顯微鏡下觀察。 注意事項(xiàng): 1. 含酚紅培養(yǎng)基對(duì)觀察有輕微影響。建議使用無(wú)酚紅培養(yǎng)基。 2. 染色液工作濃度和染色時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況適當(dāng)調(diào)整,以期達(dá)到最佳效果。 3. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套。 4. 操作是需要避光。 |