免疫磁珠分離技術(shù)及應(yīng)用
一、前沿
免疫磁珠分離技術(shù)(Immunomagnetic beads sep—aration techniques，IMB) 是將免疫學(xué)反應(yīng)的高度特異性與磁珠特有的磁響應(yīng)性相結(jié)合的一種新的免疫學(xué)技術(shù)；是一種特異性強(qiáng)、靈質(zhì)純化敏度高的免疫學(xué)檢測(cè)方法和抗原純化手段。是近年來國(guó)內(nèi)外研究較多的一種新的免疫學(xué)技術(shù)。
目前該項(xiàng)技術(shù)在細(xì)胞分離、蛋白、免疫學(xué)及微生物學(xué)檢測(cè)等方面均取得了較大的進(jìn)展，是目前最有推廣價(jià)值的技術(shù)之一。
二、免疫磁珠分離技術(shù)介紹
1、免疫磁珠分離技術(shù)原理
利用人工合成的內(nèi)含鐵成分，可被磁鐵磁力所吸引，外有功能基團(tuán)，可結(jié)合活性蛋白質(zhì)(抗體)的磁珠，作為抗體的載體。當(dāng)磁珠上的抗體與相應(yīng)的微生物或特異性抗原物質(zhì)結(jié)合后，則形成抗原-抗體-磁珠免疫復(fù)合物，這種復(fù)合物具有較高的磁響應(yīng)性，在磁鐵磁力的作用下定向移動(dòng)，使復(fù)合物與其他物質(zhì)分離，而達(dá)到分離、濃縮、純化微生物或特異性抗原物質(zhì)的目的。
2、免疫磁珠法分類
⑴、陽性分離法
磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞
⑵、陰性分離法
磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞，游離于磁場(chǎng)的細(xì)胞為所需細(xì)胞。一般而言，陰性分離法的磁珠用量比陽性分離法的大，陽性分離法用的更多。磁性微珠是以金屬離子為核心，外層均勻包裹高分子聚合體的固相顆粒。磁性微珠上既可標(biāo)記針對(duì)某種細(xì)胞表面抗原的特異性抗體（直接法）; 也可標(biāo)記羊抗鼠IgG抗體(間接法），使分離細(xì)胞的范圍大大擴(kuò)大。
3、免疫磁性微球的制備
基本技術(shù)路線：制成磁性材料的微球，再在微球表面引入活性基團(tuán)，通過載體表面偶聯(lián)反應(yīng)可將抗體結(jié)合到載體上，形成免疫磁性微球。
優(yōu)質(zhì)微載體的性能：合適且均一的磁響應(yīng)強(qiáng)度,較小且均一的粒徑,穩(wěn)定均一、特異吸附的表面性能。
5、用于分型
免疫磁珠法可被應(yīng)用于臨床器官移植供受者的快速選配。在高梯度磁場(chǎng)下,用免疫磁珠法分離靜脈或腹腔血中T、B淋巴細(xì)胞，并利用分離的淋巴細(xì)胞進(jìn)行HLA-ⅠⅡ類抗原分型。如采用磁珠技術(shù)和單抗試劑建立起可在1.5h完成HLA-ⅠⅡ類抗原一類分型的新方法，還可應(yīng)用免疫磁珠分離技術(shù)進(jìn)行腎移植供受體的HLA分型、探討血液病患者反復(fù)血小板輸注的治療效果與HLA之間的相關(guān)性。
6、用作靶向釋藥系統(tǒng)的載體
免疫磁性微球作為靶向釋藥系統(tǒng)的載體可使免疫磁性微球上的抗癌藥物更易與癌細(xì)胞接觸，服用這種制劑后，在體外適當(dāng)部位用一適宜強(qiáng)度的磁鐵，將磁性微球引導(dǎo)到體內(nèi)特定靶區(qū)，提高了殺傷癌細(xì)胞的效果。很多研究者使用不同的方法制成了針對(duì)不同癌細(xì)胞的免疫磁性微球，作為靶向釋藥系統(tǒng)的載體并在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)這種釋藥載體具有良好的功效。
